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技术文章
薄层色谱小知识

 1、怎样提高点样效率? 点样是造成TLC定量误差的主要来源。     定量毛细管更适合较小体积的点样;微量

注射器更适合较大体积的点样。这主要是因为微量注射器受小气泡、溶液回爬现象的影响较大。为避免不同定量毛细管理体制的

占样误差,建议一块薄层板上zui好用同一只定量毛细管。但应注意更换样品时,应将毛细管用超声波或不同性溶课剂清洗干净

。在制备样品时,溶样溶剂黏度不能过高,以便于点样;溶剂沸点过低则进样体积易变,过高则会改变展开剂组成;对样品溶解

度过高会使样点发生空心现象,常用的溶剂为甲醇、乙醇、丙酮。经典TLC样点原点一般为直径3mm点间距离1-2cm底边距离

1.5cm;HPLC样点原点一般为直径1mm点间距5mm底边距1cm.   2、展开剂的选择  TLC与HPLC相比,一个突出的优点就是流动相的选

择具有更大的灵活性,流动相的选择的目的是使绝大部分样品的Rf值位于0.1-0.7之间并达到较好的分离,与此对应的是流动相

要有适当的强度和组成。流动相强度越大,溶质Rf值越大,但很可能降低分离能力;另外单一溶剂很难分离较复杂的混合物、根

据相似相溶原理,要使用多元溶剂体系。一般展开剂体系选择如下:根据分离样品性质、薄层色谱板性质选择一个二元溶剂体系

,通过调节溶剂比例以寻求适合Rf值,适合的Rf值找到后,再寻求性参数相同的二元溶剂体系两个,以这三个组成为三点组成

一个三角形,则可看到:三角形顶点是二元体系,边是三元体系,三角形内是四元体系,并且性一致,可根据几何原理得出任

一点组成,这种方法较为直观,也较简单。 理想的显色希望灵敏度高,斑点颜色稳定、斑点与背景间的对比度好,斑点的

大小及颜色的深度与物质的量成正比,在样品组成并不已知的情况下,通用显色方法显得尤为重要. 通用显色方法主要有:  

1、紫外照射法:方便、不破坏样品;  2、碘蒸气法:通用性强,与紫外法结合灵敏度高于该两法单独使用; 3、荧光试剂:制

造荧光背景,使原来紫外下无荧光物质被鉴别,有荧光物质更明显;    展开剂选择的大概原则  选择展开剂一般要用混合溶剂

:一般要有一种对所要展开样品溶解度较大的溶剂,视样品的性,再选用相应的体系

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