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技术文章
TLC薄层色谱法

  薄层色谱法,又简写为TLC,常用于中药成方制剂中有效成分的定性鉴别。由于该方法鉴别专属性强,使用设备简单,易于操作,故应用广泛,在目前的药品质量标准定性鉴别中(如中国药典和食品药品监督管理局标准),已大大地超过了显微鉴别、理化鉴别和光谱鉴别。
 
    笔者在zui近的医院制剂申报过程中,对质量标准的制定,使用了大量的薄层谱法,积累了一定的工作经验。下面,对薄层色谱法在中药复方制剂中的应用,提出自己的一些思路。 
 
    一、医院制剂由于其自身的特殊性,如只能在本院销售,生产和检验设备简陋,生产量小,剂型和品种相对较多,生产中常以水煎煮为主。故在选择处方中的薄层定性药材时,应以选择水溶性成分为先。如芍药苷、栀子苷、黄芪甲苷、龙胆苦苷、人参皂苷等苷类或绿原酸、阿魏酸等易溶于水的有机酸类成分。
 
    二、仔细分析处方。选择方中薄层定性的药材,应先选取以粉碎入药的药材。因为这部分药材中的有效成分一般没被破坏,特别是一些含有挥发性成分的药材,如薄荷、香附、荆芥等,在薄层层析中以药材作为对照品,很容易鉴别出来。
 
    三、对处方中含有多糖类或淀粉质较多的药材,如麦冬、北沙参、党参等,可采取先酸解后用有机溶剂提取的方法。经这样处理后,薄层层析斑点一般都比较清晰,药检所复核时往往容易通过。
 
    四、在使用展开剂时,在同等条件下,应选择无毒或毒性较小的有机溶剂。如选用环己烷而不选用正己烷,选用甲苯而不选用苯。以减少有机溶剂毒性对人体的侵害。
 
    五、对样品的取样量不宜太大。如果取样量太大,点样时往往因样品的浓度太高而造成点样困难,展开时斑点又不易分离而使薄层图谱不清晰。
 
    六、对中药复方制剂的液体剂型,提取分离方法应溶剂法,用适宜的有机溶剂提取。如是提取水溶性成分,应考虑对样品进行脱脂处理。对酒剂、酊剂或搽剂中含有的样品,应先在水浴上蒸去后再作下一步的处理。如液体剂型不宜用有机溶剂提取,也可采用先将药液置水浴上蒸干(或加入适量硅藻土分散),再用有机溶剂提取的方法。
 
    七、对中药复方制剂的固体剂型,提取分离方法可选用超声提取法、回流提取法或溶剂提取法(应先将样品加定量水溶解)等。超声提取方法简单,所需时间短,目前使用较多,应,但在使用过程中应注意一个问题,如提取时使用的有机溶剂是,超声处理时间应控制在10~20min以内,超声时容器不能密闭太紧,以免瓶塞冲出或全部挥发,特别是在气温较高的夏天,尤其要注意。
 
    八、对中药复方制剂的外用剂型,如软膏剂、黑膏药、贴膏一类,在样品处理时,应首先考虑去掉赋形剂后再对样品进行处理。如用凡士林制成的软膏,可用有机溶剂除去凡士林。
 
    九、样品经薄层展开后,观察层析情况,笔者认为应多选择在日光下观察为主。原因为大多数医院制剂室未建立暗室,在紫外光灯下拍照有困难。
 
    十、对样品中某些成分的提取分离,可先采取相类似的方法,然后再选用不同的定容溶液和展开剂,即可达到目的。如同时提取某些皂苷类、苷类、有机酸类等。
 
    十一、在中药复方制剂中,往往药味较多,化学成分较为复杂,给单一成分的分离造成一定困难。为了达到分离的目的,在具体操作中,可以考虑使用高速离心,柱层析、氧化镁净化、水或氨试液洗涤等多种操作方法。但在使用这些方法时,必须注意不能把应提取的有效成分弃掉了。
 
    十二、在用碘蒸气或氨蒸气对薄层板显时,所加的量不宜过多,使用的容器必须密闭,操作人不得离开,必须等到薄层斑点显度适宜时,才可取出。

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